2015-08-18 索萊寶生物
1實(shí)驗(yàn)原理
細(xì)胞在變性劑的作用下被裂解，同時(shí)核蛋白體上的蛋白變性，核酸釋放；釋放出來(lái)的DNA和RNA由于在特定PH下溶解度的不同而分別位于整個(gè)體系中的水相和中間相，從而得以分離；有機(jī)溶劑抽提，沉淀，得到純凈DNA。
2試驗(yàn)方法
材料準(zhǔn)備→破碎細(xì)胞，釋放內(nèi)容物→核酸分離、純化→核酸的沉淀或吸附及雜質(zhì)的去除→核酸溶解保存
1.試劑盒提取法
公司產(chǎn)品
D1500 植物基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D1600 細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D1700 動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒400.00/700.00
D1800 全血基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D1850 全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng) solarbio 50T/200T 盒 360.00/960.00
D1900 酵母基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D2100 通用基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D2300 真菌基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 500.00/850.00
D2400 DNA病毒基因組提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
D2600 土壤基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 680.00/1200.00
D2700 糞便基因組DNA提取試劑盒 solarbio 50T/100T 盒 400.00/700.00
2.苯酚氯仿提取法
實(shí)驗(yàn)步驟
① 裂解液（SDS/異硫氰酸胍）、RNAse、蛋白酶K等55～65℃裂解細(xì)胞，使蛋白變性，釋放核酸，加入KAc以提高鹽濃度，使蛋白質(zhì)、多糖等沉淀。
② 裂解*后加入一定體積的苯酚-氯仿，混勻后離心取上清；
③ 加入等體積氯仿-異戊醇，混勻后離心取上清水相；
④ 加入定量的異丙醇，使DNA沉淀，加入適量的核酸助沉劑或乙酸鈉以增加核酸的獲得率，離心除去上清；
⑤ 用70%的乙醇洗滌1～2次，加入適量氯化鈉或氯化鋰等去除多糖；(可用PEG代替乙醇，具有去多糖作用)
⑥ 待酒精揮發(fā)*后，用TE緩沖液溶解DNA，保存?zhèn)溆谩?/SPAN>
溫馨提示：本公司出售以上實(shí)驗(yàn)中所用到的各種產(chǎn)品，有意者請(qǐng)！
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3常見(jiàn)問(wèn)題
4注意事項(xiàng)
① 酚一定要堿平衡。苯酚具有高度腐蝕性，氯仿易燃、易爆、易揮發(fā)，具有神經(jīng)毒作用，操作時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。
② 取各上清時(shí),不應(yīng)貪多,以防非核酸類(lèi)成分干擾；
③ 乙醇洗滌后要充分晾干，以免影響后續(xù)反應(yīng)；
④ 各操作步驟要輕柔,避免因機(jī)械損傷，造成DNA斷裂；
⑤ 為了您的安全，實(shí)驗(yàn)室請(qǐng)帶防護(hù)口罩和手套。
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